{"subject":"[陽明校區] 超微量核酸定量光譜儀 NanoDrop ND-1000","detailContent":"\r\n
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\r\n\t- 廠牌型號：NanoDrop ND-1000
\r\n\t- 儀器位置：陽明校區\r\n\t
\r\n\t\t- 生物醫學大樓7F. 701室 (E機)
\r\n\t\t- 護理系館2F. 212室 (F機)
\r\n\t\t- 圖資大樓6F. 615室 (C機)
\r\n\t\t- 守仁樓B1. B02室 (D機)
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\r\n\t \r\n\t- 使用資格：隨到隨用\r\n\t
\r\n\t\t- 校內免費，校外請洽中心人員
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\r\n\t \r\n\t- 聯絡中心人員：\r\n\t\r\n\t
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ND-1000超微量分光光度計是NanoDrop的第一個產品，應用液體的表面張力特性，只需要1~2μl樣品即可量測。在偵測台上，經上下臂的接觸拉出固定的光徑（1mm及0.2mm）偵測吸收值，達到快速、微量、高濃度、免石英管、免毛細管等耗材的優點。此產品設計受專利保護，並在全世界廣受歡迎，其準確度與便利性讓科學家得以更有效率進行各項研究。
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\r\n\t- ND-1000使用高能量氙燈（pulsed xenon flash lamp），可提供220~750nm的全光譜偵測，且不需要暖機，開機後可立即使用。搭配高感度CCD array偵測器，偵測吸收值可高達75Abs（dsDNA濃度2~3700ng/μl），大部分純化後的核酸幾乎都不需要稀釋即可偵測。
\r\n\t- 待測樣品的均質性是ND-1000的最高要求，樣品能在偵測前以vortex mixer震勻為最佳，若無vortex mixer也應以pipette吸放數次混勻。若擔心genomic DNA可能因前述動作而斷裂，可改以55ﾟC加熱約一分鐘，使樣品在偵測前呈現均勻狀態。（注意：本中心NanoDrop僅限量測核酸樣品，嚴禁測蛋白質類！）
\r\n\t- 偵測時選擇不同模式，可以得到最快速的結果：\r\n\t
\r\n\t\t- Nucleic Acid – 吸收光譜、230nm、260nm、280nm吸收值（換算成10mm光徑吸收值）、260/280 ratio、260/230 ratio及核酸濃度。
\r\n\t\t- UV-Vis – 220~750nm間所有波長的吸收值及光譜（以1mm光徑吸收值呈現）。
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\r\n\t濃度範圍\r\n\t\r\n\t\t\r\n\t\t\t| 樣品種類 | \r\n\t\t\t最低濃度 | \r\n\t\t\t最高濃度 (超過此濃度請稀釋樣品) | \r\n\t\t\t再現性 (五重複以上) | \r\n\t\t
\r\n\t\t\r\n\t\t\t| 核酸 | \r\n\t\t\t2 ng/μl | \r\n\t\t\t3700 ng/μl (dsDNA)
\r\n\t\t\t3000 ng/μl (RNA)
\r\n\t\t\t2400 ng/μl (ssDNA) | \r\n\t\t\t濃度範圍在 2-100 ng/μl 時，SD為 ± 2 ng/μl
\r\n\t\t\t濃度範圍大於 100 ng/μl 時，CV為 ± 2% | \r\n\t\t
\r\n\t\t\r\n\t\t\t| 純BSA | \r\n\t\t\t0.10 mg/ml | \r\n\t\t\t100 mg/ml | \r\n\t\t\t濃度範圍在 0.05-10 mg/ml 時，SD為 ± 0.10 mg/ml
\r\n\t\t\t濃度大於 10 mg/ml 時，CV為 ± 2% | \r\n\t\t
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使用方法舉例：dsDNA
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\r\n\t- 在主畫面點選Nucleic Acid，依軟體跳出對話框動作（確認台面清潔，並在偵測台上點1μl二次水，放下上臂後再按OK）完成電腦與儀器連線。
\r\n\t- 依照DNA所溶於之液體準備該溶液（務必確認DNA溶於二次水、TE buffer或哪一組kit的elution buffer），取出1.5~2 μl點在偵測台上，放下上臂後再按Blank。
\r\n\t- 在右上方拉選Sample Type DNA-50，在Sample ID位置輸入樣品名稱，將樣品 混勻，取出1.5~2 μl點在偵測台上，放下上臂後再按Measure。
\r\n\t- 結果：
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DNA濃度即以65.003 × 50 = 3250.1算出。
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\r\n\t- 260/280介於1.8~2.0通常代表此為較純的DNA（數值隨DNA組成不同會有差異）。
\r\n\t- 260/230高於260/280，介於1.8~2.2通常表示純化過程殘留污染物較少。
\r\n\t- 若欲察看220~340nm間其他波長的吸收值，可使用滑鼠拉動位於230nm的直線，或在右邊 λ 處輸入其他數值。
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結果整理：當次偵測完的所有樣品可按Show Report得到，此report可另存為ndj檔案，使用excel開啟。 不同天的結果，可從Data Viewer內選Import Samples，將欲放在同一份report內的樣品挑選出來產生一份新的report。
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\r\n\t- 本機以隨到隨用為原則
\r\n\t- 機器操作結束後，請使用拭鏡紙（Kimwipe類）擦拭台面後，再用二次水測讀背景值，測讀值必須介於±0.05內，否則須重新清潔再重讀，直到範圍內才算清潔完畢，並記載於登記簿上。
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注意事項
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\r\n\t- 嚴禁使用測定蛋白質
\r\n\t- 偵測後立即使用拭鏡紙（Kimwipe類）擦拭台面。先取一張將上下台面的液體吸走，再將此 laboratory wipe 吸過樣品的面反折到內部，折疊四次後以單方向多次擦拭台面（DNA 擦 5次）。
\r\n\t- 同一滴液體只能做一次偵測，欲重複定量同一樣品，請擦掉前一滴，重新取出一滴進行偵測。
\r\n\t- 基本上核酸樣品可使用1~2μl做測量，隨各液體體積特性之不同會有不同體積需求，原則上不超過 2μl，請使用2μl pipette以避免體積不足導致液柱無法完整形成。
\r\n\t- 當軟體跳出錯誤訊息時，請詳細閱讀並依指示進行障礙排除。最常發生的情形是在偵測過程液柱並未正確形成，軟體會出現以下訊息。可先用肉眼觀察液柱是否未完整連接上下台面或樣品內有泡泡，將上臂拉起後，擦掉該滴樣品，再重新進行偵測，必要時可將樣品體積加大至2μl。
\r\n\t![\"軟體跳出錯誤訊息\"](\"/userfiles/ordch/images/20231017141926424.gif\")
\r\n\t- 正確的液柱應為：
\r\n\t![\"正確的液柱示意圖\"](\"/userfiles/ordch/images/20231017141950183.jpg\")
\r\n\t- 不可使用含有Hydrofluoric Acid (HF)之樣品，其他無腐蝕性之液體皆可使用。
\r\n\t- 儀器上方的黑色線為光纖，使用時請勿拉扯。
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\r\n\t- 平時保持台面及儀器本身清潔。
\r\n\t- 定期校正。
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\r\n\t- 【ND-1000使用手冊】 \r\n\t
\r\n\t\t![\"【ND-1000使用手冊】\"](\"/userfiles/file/pdf.png\")
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\r\n\t- 教學影片「實機操作」 影片一\r\n\t
\r\n\t\t![\"教學影片「實機操作」 影片一\"](\"/userfiles/file/link.png\")
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\r\n\t- 教學影片「實機操作」 影片二\r\n\t
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![\"超微量核酸定量光譜儀](\"/userfiles/ordch/images/20231017140737979.jpg\")
![\"軟體頁面結果圖\"](\"/userfiles/ordch/images/20231017141644462.gif\")